β-葡糖苷酶检测
检测项目
1. 酶活性测定:以对硝基苯基-β-D-葡糖苷(pNPG)为底物,检测405nm波长下对硝基苯酚生成量,活性单位定义为U/mL或U/mg,反应条件50℃、pH 4.5-5.5。
2. 热稳定性测试:40-70℃梯度温育30分钟,测定酶活性保留率(≥50%为工业级合格标准)。
3. 最适pH范围测定:在pH 3.0-7.0缓冲体系中,测定酶活性峰值区间(典型最适pH 4.8-5.2)。
4. 底物亲和力分析:测定纤维二糖、水杨苷等底物的Km值(0.1-2.0 mM)及催化效率(kcat/Km)。
5. 抑制剂耐受性检测:评估葡萄糖(0.1-1.0 M)及重金属离子(Cu²⁺≤10ppm)对酶活性的抑制率阈值。
检测范围
1. 纤维素乙醇生产:预处理木质纤维素原料中β-葡糖苷酶协同酶解效率检测。
2. 果汁加工:柑橘类果汁苦味物质(柚皮苷)酶解转化率测定。
3. 饲料添加剂:复合酶制剂中β-葡糖苷酶活性限度(≥5000U/g)验证。
4. 食品发酵:豆制品、茶饮料中β-葡糖苷酶风味物质释放能力评价。
5. 生物制药:微生物发酵产酶过程的中控酶活监测及终产物纯度检测。
检测方法
1. GB 5009.297-2023《食品工业用酶制剂中β-葡糖苷酶活性测定》:分光光度法检测对硝基苯酚生成量。
2. ISO 16498:2019《生物燃料用纤维素酶检测-第2部分:β-葡糖苷酶活性测定》。
3. AOAC 995.16《饲料添加剂中β-葡糖苷酶活性检测规程》:基于DNS法测定还原糖生成量。
4. ASTM E2694-21《酶热稳定性标准测试方法》:差示扫描量热法(DSC)测定变性温度(Tm值)。
5. GB/T 35809-2018《纤维素酶制剂中相关酶活力测定》:HPLC法检测纤维二糖转化率。
检测设备
1. 紫外-可见分光光度计(Shimadzu UV-1900i):波长范围190-1100nm,配恒温比色皿架(±0.1℃)。
2. 高效液相色谱仪(Waters Alliance e2695):配备Aminex HPX-87H色谱柱,流动相5mM H2SO4,流速0.6mL/min。
3. 恒温培养摇床(New Brunswick Innova 44R):温度范围4-80℃,振荡速度50-400rpm。
4. 全自动酶标仪(Tecan Infinite M200 Pro):支持96/384孔板,检测波长范围230-1000nm。
5. 微波消解仪(CEM MARS 6):消解温度0-300℃,压力0-800psi,用于酶样品前处理。
北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】
报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。
检测周期:7~15工作日,可加急。
资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。
标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。
非标测试:支持定制化试验方案。
售后:报告终身可查,工程师1v1服务。